Sementara itu, Mithridates memperbaiki pasukannya dan mengkonsolidasikan kekuasaannya ketika dia diserang oleh Murena, gubernur Romawi di Asia, yang takut Mithridates akan menyerangnya. Konflik ini dikenal sebagai Perang Mithridatik yang kedua (83-82 SM).
Murena menyerbu Pontus di depan pasukannya tetapi berhasil digagalkan. Mithridates sebenarnya sudah memiliki rencana untuk melakukan serangan balik tetapi Sulla sudah memerintahkannya untuk berhenti. Mithridates mematuhinya.
Tapi, tidak demikian dengan di masa depan. Mithridates memilih melawan perintah Sulla dengan memperkuat aliansinya dengan Tigranes sambil membuat perjanjian dengan bajak laut Kilikia, Dinasti Ptolemaik Mesir, suku-suku Trakia, dan pemimpin budak pemberontak Spartacus.
Sebenarnya tindakan tersebut lebih bertujuan untuk mengganggu Roma dan mengganggu perdagangan, bukan terlibat dalam perang terbuka. Namun, pada tahun 75 atau 74 SM raja Nicomedes IV dari Bithynia meninggal dan, dalam wasiatnya, menyerahkan kerajaannya kepada Roma.
Ini tidak dapat diterima oleh Mithridates yang mengeklaim wasiat tersebut palsu dan memasang pilihannya sendiri sebagai raja Bithynia sebagai tantangan terhadap Roma. Romawi meminta dia untuk menghapus pilihannya dan, ketika dia menolak, langsung menyatakan perang.
Perang Mithridatik yang ketiga (73-63 SM) tidak dimulai sebaik yang pertama bagi Mithridates. Jenderal Romawi Cotta cukup mudah dikalahkan, tetapi Lucius Licinius Lucullus (sekitar 89-66 SM) terbukti sebagai lawan yang lebih tangguh.
Lucullus mengusir Mithridates keluar dari Bithynia dan kemudian menyerbu Pontus. Mithridates terdesak mundur karena satu demi satu benteng jatuh ke tangan Lucullus dan akhirnya harus melarikan diri dari Pontus ke Armenia di mana dia disambut di pengadilan Tigranes.
Lucullus mengirim pesan kepada Tigranes bahwa dia harus menyerahkan Mithridates dan, sambil menunggu respons, mulai memulihkan provinsi-provinsi Romawi sebelumnya.
Dia yang menyadari sentimen anti-Romawi yang berlarut-larut dan, tentu saja, mengingat peristiwa Vesper Asia, kemudian mencoba memenangkan hati rakyat dengan menurunkan pajak dan membangun kembali kota dan desa.
Sekitar tahun 69 SM dia akhirnya menerima jawaban dari Tigranes yang mengatakan dia tidak akan mengekstradisi Mithridates dan Lucullus pun bergerak menuju Armenia. Dia mengepung ibu kota Tigranes dan berhasil menaklukkannya, akan tetapi Tigranes dan Mithridates berhasil melarikan diri.
Lucullus dipanggil kembali ke Roma dan digantikan oleh Pompey yang memulai kampanyenya dengan menghancurkan sekutu Mithridates, bajak laut Kilikia.
Tewas Usai Dikhianati Putra Sendiri
Tigranes lalu memberikan pasukan kepada Mithridates agar ia dapat merebut kembali kerajaannya. Apalagi saat itu Pompey sedang sibuk mengatasi para bajak laut. Mithridates pun bergerak kembali ke Pontus, membunuh para bawahan yang ditinggalkan Lucullus untuk mengurus wilayah tersebut, dan merebut kembali takhtanya.
Namun, Pompey tidak tinggal diam, ia membentuk aliansi dengan raja Parthia, Phraates III, yang segera menyerbu Armenia sementara Pompey bergerak menuju Pontus. Tigranes tidak lagi dapat membantu Mithridates yang kini terusir dari ibu kotanya dan terpaksa mundur terus-menerus saat Pompey maju.
Mithridates berharap dapat mencapai harta kekayaannya di sekitar Laut Hitam dan meminta bantuan putranya, Machares, tetapi ketika ia tiba di sana, ia kecewa.
Machares telah bersekutu dengan Roma dan menolak ayahnya; sehingga Mithridates membunuhnya. Putra lainnya, Pharnaces, kemudian memberontak dan memimpin pasukan melawan Mithridates saat Pompey semakin mendekat.
Sendirian bersama dua putrinya yang masih muda di sebuah benteng, Mithridates memilih untuk mengakhiri hidupnya sendiri daripada ditangkap dan dipamerkan dalam pawai kemenangan Romawi. Setelah meracuni putrinya, dikatakan ia mencoba meracuni dirinya sendiri tetapi gagal dan kemudian meminta seorang budak atau pelayan untuk membunuhnya.
Penulis Romawi kemudian mengejek kematiannya, menunjukkan bahwa raja yang telah menghabiskan seumur hidupnya bekerja dengan racun tidak mampu meracuni dirinya sendiri secara efektif.
Namun, Dr. Mayor telah menunjukkan bahwa dikatakan Mithridates selalu membawa cukup racun untuk membunuh dirinya sendiri jika ia ditangkap oleh Romawi tetapi terpaksa memberikan setidaknya setengah dari dosis ini untuk putrinya. Apapun racun yang tersisa, kemudian, tidak cukup untuk seorang pria dengan konstitusi Mithridates.
Kisah selanjutnya tentang Mithridates yang harus memohon kepada musuh-musuhnya untuk membunuhnya adalah rekayasa Romawi. Pompey mengakui kehebatan raja dalam kematian dan memakamkannya dengan penuh kehormatan di Sinope, kota kelahirannya.